博迅股份干燥箱用于抗疲劳活性研究！！！

试剂与仪器

HX-400A 型高速中药粉碎机：浙江省永康市溪岸 五金药具厂；HH-6 数显恒温水浴锅：金坛市佳美仪器 有限公司；DF-101S 集热式磁力搅拌器：金坛市医疗器 械厂；DZF-6050 型真空干燥箱：上海博迅实业有限公 司；UV-1700 紫外分光光度计：日本岛津（中国）有限 公司；AB135-S 电子分析天平：梅特勒-托利多国际贸 易（上海）有限公司；HZP-L502 数字型 pH 计：福州华 志科学仪器有限公司；5804R 低温离心机：美国贝克曼 库尔特有限公司；SCIENTZ-50F 冷冻干燥机：宁波新 芝冻干设备股份有限公司；K9840 自动凯氏定氮仪： 济南海能仪器股份有限公司。酸枣仁药材：安徽亳州药材市场；碱性蛋白酶 （200 U/mg）、中性蛋白酶 （100 U/mg）、木瓜蛋白酶 （800 U/mg）：上海源叶生物科技有限公司；血清尿素 氮、血乳酸、肝糖原、肌糖原、乳酸脱氢酶、超氧化物歧 化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、丙二醛、Na+ -K+ -三磷酸腺 苷酶检测试剂盒：南京建成生物工程研究所有限公 司；其它试剂均为分析纯。

方法

取酸枣仁蛋白，加入蒸馏水溶解配制成 5%的蛋 白溶液，酶占底物的质量分数为 2%，分别加入碱性蛋 白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶，分别调节至最适温度 和最适 pH 值酶解 3 h，酶解完毕后，将溶液置于 90 ℃ 水浴中灭酶 10 min，8 000 r/min 离心 10 min，取上清 液，冻干得酸枣仁蛋白酶解产物[9]。取脱脂酸枣仁粉末，按 1 ∶ 25（g/mL）的料液比加入 蒸馏水溶解，用 1 mol/L 的 NaOH 溶液调节溶液 pH 11， 57 ℃恒温搅拌提取 50 min，3 000 r/min 离心 20 min，过 滤得上清液，用 1 mol/L 的盐酸溶液调节溶液 pH 4，置 于 4 ℃下静置 2 h，3 000 r/min 离心 10 min，沉淀用水复 溶，用 1 mol/L 的 NaOH 调节溶液 pH 7，透析 48 h，冻 干得酸枣仁蛋白。采用 GB 5009.5—2016《食品安全国家标准 食品 中蛋白质的测定》中的凯氏定氮法测定酸枣仁脱脂粉 的蛋白质含量，采用福林酚法测定酸枣仁蛋白酶解产 物中蛋白质含量，按下式计算蛋白质回收率。