紫外杀菌在洁净工作台中材料与方法的研究

1.1 原料

实验室自制果汁，并在室温下开盖放置36 h，果汁与空气直接接触，使果汁在自然环境条件下污染一 定浓度的杂菌.

1.2 培养基 普通营养培养基：胰蛋白胨 5 g，酵母浸粉 2.5 g，葡萄糖 1.0 g，琼脂粉 15.0 g，pH 值 7.0，去离子水 1 000 mL，121 ℃灭菌30 min.

1.3 主要仪器与设备 YXQ-LS-70A型高压灭菌锅（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；BGE-240型烘干箱；SW-CJ-2D型洁净工作台；LRH-70型生化培养箱.

1.4 含菌培养皿的准备 本文采用直径为9 cm的培养皿（表面积为3.14×4.52=63.585 cm2 ），按照平板菌落计数法测定自制果 汁中细菌污染情况，重复3次，取平均值.

然后吸取自制饮料1.0 mL均匀涂布至普通培养基上，涂布后的 含菌培养基上细菌分布密度可由公式（1）计算得到.

 1.5 洁净工作台乙醇辅助紫外杀菌效果的确定 将21个含菌培养基分为7组，分别置于洁净工作台（操作空间为1150×500×500 mm）中，将培养皿盖 打开，

然后开启紫外灯（40 W）照射30 min，每隔5 min取出1组培养皿. 洁净工作台中均匀喷入10 mL 75%乙醇溶液，然后按照上述方法将开盖的含菌培养基置于洁净工作 台中紫外灯照射30 min，

未经紫外线照射的作为阴性对照，取出的培养皿于37 ℃条件下培养24 h，进行 细菌总数计数，取3次重复的平均值.

1.6 洁净工作台无菌环境维持时间的确定 将开盖的含菌培养基置于洁净工作台中，采用乙醇辅助紫外线照射25 min，然后将紫外灯关闭，

培养 皿继续置于洁净工作台中48 h，每隔12 h取出1组培养皿，置于37 ℃下培养24 h，进行菌落计数，每组3 个重复，取平均值.